常规化学合成的siRNA序列为21～23nt的双链小分子RNA，为冻干粉形式的即用型试剂，在常温不溶解的情况下可以保存至少1个月时间，放置于-20℃～-80℃低温环境中，冻干粉可以稳定保存一年。

试剂配置：收到冻干粉剂后，2000rpm短暂离心，将粉剂离到管底，在超净工作台上喷洒RNA酶去除剂清除实验桌面和离心管等实验耗材表面的RNA酶污染，使用无RNA酶枪头吸取RNase-free water溶解到实验浓度（1-100nM），分装成100μl/管，-20℃储存。

实验（本次选择小鼠基因VEGF进行RNAi研究）：
1、siRNA设计合成：NCBI搜索小鼠VEGF的基因信息，使用设计软件设计出的siRNA序列，送合成公司合成，具体信息如下：

2、接种细胞：将RAW264.7细胞接种到6孔板中，细胞数为2×104。

3、在进行下述转染步骤前，把培养有细胞的六孔板每孔换成2mL新鲜培养液(含有血清和抗生素的完全培养液)。

4、取一个洁净无菌离心管，对于待转染的六孔板中每一个孔的细胞，加入125µl不含抗生素和血清的DMEM培养液(高糖DMEM或低糖DMEM均可) 加入100pmol siRNA，并用枪轻轻吹打混匀；再加入4µl LipoRNAi转染试剂，用枪轻轻吹打混匀，请特别注意不可涡旋或离心。配制完成后，室温存放6小时内稳定。（如果发现有细胞毒性，可以把转染试剂的用量在2-4μl范围内进行适当调节，siRNA用量可以在50-250pmol的范围内进行适当调节，具体情况根据所研究的基因决定）。

5、将配制好的siRNA转染复合液加入各细胞孔中，摇动培养板，轻轻混匀。37℃，5% CO2培养箱培养，直至发挥干扰作用，实验分组为空白组、无关对照组（无关siRNA）、实验组1、实验组2和实验组3。

6、培养约2天左右后，收集细胞，使用RT-qPCR和Western-Blot检测siRNA对于靶基因VEGF的下调效果。CCK-8检测siRNA转染后对细胞增殖的影响。